Recuento de enterobacterias lactosa- positivas- coliformes

Objetivo: Preparar diluciones decimales, recuento en medio líquido, diferenciar microorganismos lactosa positivos de negativos y evaluar la producción de ácidos y gases.

• Preparación de diluciones decimales:

Material:

- 3 tubos de 9 ml de agua destilada estéril
-Pipeta automática y puntas
- Placa calefactora
-Agitador orbital

Técnica:

1. Transferir 1 ml de la muestra analizar (carne picada) a un tubo que contenga 9 ml de agua (dilución 1/10).
2. A partir de la mezcla anterior incorporar 1 ml a otro tubo que contenga 9 ml de agua estéril (dilución 1/100).
3. Repetir este proceso y obtener la dilución (1/1000)

• Recuento en medio liquido

Material:

- 3 series de 3 tubos con 10 ml de medio de cultivo Brillant Green Bile Lactose(BHBL)

-Campanas de Durham

-Pipeta automática y puntas

-Mechero Bunsen

-Estufa de cultivo

Técnica:

1. En cada uno de los tubos de la 1º serie echamos 1 ml de la dilución 1/10
2. En cada uno de los tubos de la 2º serie echamos 1 ml de la dilución 1/100
3. En cada uno de los tubos de la 3º serie echamos 1 ml de la dilución 1/1000
4. Echamos en cada uno de los tubos la campana de durham, tapamos con papel film y con tapones
5. Metemos a incubar los tubos en la estufa a 37º C durante 24 horas.

Recuento en medio líquido: